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免疫毒性指标有3个:(1)应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,观察中性粒细胞数量;(2)应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,观察巨噬细胞数量(荧光强度);(3)注射红色荧光微球,巨噬细胞吞噬微球排出体外
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斑马鱼药物毒理学评价技术已经通过了美国FDA和欧洲EMA的GLP认证,中国也已将斑马鱼模型的研究列入“重大新药创制”专项。利用斑马鱼进行毒性和安全性评价具有可靠、快速的优点,能同时看到各个器官的影响。
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经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗肺炎药物在中性粒细胞、炎症基因表达和病理结构均与正常对照组相似,未出现模型对照组的中性粒细胞数显著增加炎症基因表达水平明显升高和病理出现中性粒细胞渗出的情况。
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实验结束后,以各浓度组织器官反应及死亡情况的统计学分析结果评价药物对斑马鱼的毒性,并对典型毒性器官进行拍照。
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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用生长发育促进剂的斑马鱼脊椎骨数量比正常对照组增多。2.本实验证实了维生素D3、碳酸钙具有明显促进生长发育功效。
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正常对照组未摄入PTZ,模型对照组与安神助眠剂组都摄入了等量的PTZ(PTZ通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。安神助眠剂组在摄入PTZ前服用睡安片之类的安神助眠剂。
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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼毛细胞明显减少,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有听毒性。
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